芒果果實(shí)多酚氧化酶（PPO）基因的克隆與表達(dá)分析

時(shí)間：2023-09-26作者：魏婷婷等 來(lái)源：《中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)》2023年第5期

摘 要：多酚氧化酶（Polyphenol oxidase，PPO）是引起水果褐變的關(guān)鍵酶。為了研究芒果果實(shí)中PPO基因的功能，本試驗(yàn)采用RACE方法從‘貴妃’芒果果實(shí)中克隆得到了1個(gè)PPO基因，該基因cDNA序列全長(zhǎng)為1930bp，開(kāi)放閱讀框?yàn)?782bp，編碼593個(gè)氨基酸。芒果PPO基因編碼的多酚氧化酶屬于親水性蛋白質(zhì)，分子重量為66.82KD，等電點(diǎn)為6.95，不含跨膜結(jié)構(gòu)和信號(hào)肽，為非分泌蛋白，包含Tyrosinase、PPO1_DWL和PPO1_KFDV保守結(jié)構(gòu)域。芒果PPO蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)無(wú)規(guī)則卷曲、β-折疊和α-螺旋占比分別為63.58%、22.60%和13.83%，三級(jí)結(jié)構(gòu)與模板6els.1.A一致性達(dá)70.94%，可能與C2H2 and C2HC zinc fingers superfamily protein（TT1），Multidrug resistance protein, mate family（TT12）和Autoinhibited H(+)-ATPase isoform 10（AHA10）等存在相互作用。聚類(lèi)分析表明該蛋白與開(kāi)心果、橄欖、克萊門(mén)柚和甜橙等植物的親緣關(guān)系較近。通過(guò)qRT-PCR分析，芒果PPO基因主要在‘桂七’果皮中表達(dá)量較高，而在‘貴妃’果皮中表達(dá)量較低。該基因的克隆及其功能的研究對(duì)芒果抗酶促褐變品種的培育以及分子改良具有重大意義。

關(guān)鍵詞：芒果；多酚氧化酶；克?。槐磉_(dá)分析

全文刊登于《中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)》雜志